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EMSA紫外交联时间是多少?

编辑:上海路阳仪器时间:2022-12-26 14:29:53浏览153 次

信息摘要:

EMSA中紫外交联时间怎么确定?将尼龙膜置于滤纸上干燥片刻,在4166com金沙中将转有DNA的一面向上用120mJ/cm2能量辐照交联,4166com金沙的紫外传感器会根据当前4166com金沙的紫外线强度自动计算辐照时间,当辐照能量达到设定值时候,会自动停止辐照。

EMSA紫外交联时间

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紫外照射的目的在于使DNA 中的一小部分T 与膜表面带正电的氨基基团之间形成交联(Church and Gilbert 1984)。紫外照射不能过度,否则将造成碱基T之间发生共价结合而降低杂交信号。交联时将膜上带有DNA的一面朝向紫外光源。 

3500-1.jpg

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智能4166com金沙UCL-3500可用于Northern、EMSA blotting、EMSA等膜交联,当使用254 nm波长、能量为120.0mJ/cm2交联时,尼龙模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之间形成共价键稳定。

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按压智能4166com金沙操作面板上program按键,选择能量模式(energy),通过数字按键,输入需要照射的能量(0.120J/cm2),然后按压enter按键,这样需要的交联能量就成功设置好了,按star按键,4166com金沙开始辐照,屏幕显示剩余能量,交联时间结束后,交联仪紫外灯自动停止运行。


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